مرکز تحقیقات ژنتیک ایمنی
۱۳۹۸ پنج شنبه ۲۱ آذر
br ENGLISH
help عبارت وارد شده توسط شما در تمامی لینک ها، منوها و محتوای سایت جستجو خواهد شد.
تاریخ: 1398/04/18 تعداد بازدید: 33
ثبت اختراع توسط جناب آقاي دكتر سعيد عابديان كناري
ثبت اختراع توسط جناب آقاي دكتر سعيد عابديان كناري
خلاصه اختراع :
سرطان معده يكي از رايج ترين انواع بدخيمي ها در سراسر جهان است. براي يافتن راهكاري موثر در درمان سرطان، شناخت ژن هايي كه تغييرات بيان و يا بدتنظيمي آنها نقش اساسي را در ايجاد و پيشرفت سرطان دارد، كمك كننده مي باشد. MicroRNAs كه RNAs غير كد كننده كوچك و تك رشته ايي هستند، نقش مهمي را در تنظيم بيان ژن پس از نسخه برداري دارند. مطالعات نشان مي دهند كه برخي از miRNAs در انواعي از سرطان ها، شامل سرطان معده، تنظيم افزايشي يا كاهشي دارند، و به عنوان انكوژن يا ژن سركوبگر تومور عمل مي كنند. توليد رده هاي سلولي سرطاني كه بصورت پايدار افزايش يا كاهش سطح بيان يك ژن مشخص را نشان دهند، براي بررسي اثرات و عملكرد دقيق ژن هاي مختلف در ايجاد سرطان ارزشمند مي باشد. در اختراع حاضر، پس از سنتز و كلونينگ ژن pre-miRNA-34a در پلازميد pGFP-C1 توسط شركت GeneralBiosystems (USA)، ترانسفورميشن پلازميدها در باكتري E.Coli سويه ي DH5alpha انجام شد. به منظور تعيين غلظت مناسب از آنتي بيوتيك G418 براي انتخاب سلول هاي دريافت كننده پلازميد در ترانسفكشن پايدار، Kill curve assay انجام شد. سپس، رده سلولي Kato III با پلازميد pGFPC1-miR-34a، و pGFPC1- با استفاده ازLipofectamine ترانسفكت شد. به منظور انتخاب سلول پايدار، 48 h پس از ترانسفكشن، محيط تازه حاوي غلظت 1000 µg/ml آنتي بيوتيك G418 اضافه گرديد. پس از يك دوره انكوباسيون طولاني در غلظت بالاي آنتي بيوتيك، سلول ها جمع آوري شدند و تعيين كمي بيان miR-34a و ?-catenin از طريق تكنيك qRT-PCR و با روش سايبر گرين انجام شد. تعيين تغيير سطح پروتئين ?-catenin با استفاده از تكنيك وسترن بلات انجام شد. مشاهده رنگ سبز فلورسنت ناشي از بيان GFP به روش ميكروسكوپي، ترانسفكشن موفقيت آميز سلول ها با پلازميدها را نشان داد. افزايش بيان قابل توجه miR-34a در سلول Kato III-pGFPC1-34a در مقايسه با سلول Kato III-pGFPC1-empty با روش qRT-PCR تاييد شد. بيان پروتئين ?-catenin در سلول ترانسفكت شده با پلازميد حامل miR-34a در مقايسه با سلول Kato III-pGFPC1-empty و سلول Kato III كاهش يافت. استفاده از رده ي سلولي سرطان معده با بيان افزايش يافته ي miRNA-34a براي بررسي تغييرات بيان و همچنين تاييد ژن هاي هدف miRNA-34a كه تاكنون تاييد نشدند، مفيد مي باشد.
 
 
   
ضمايم(شرح و توصيف،ادعانامه،نقشه)
شرح و توصيف :براي دانلود فايل اينجا كليك كنيد
ادعانامه :براي دانلود فايل اينجا كليك كنيد
 
ثبت اختراع توسط جناب آقاي دكتر سعيد عابديان كناري
امتیازدهی
میانگین امتیازها:0 تعداد کل امتیازها:0
مشاهده نظرات (تعداد نظرات 0)
ارسال نظرات
نام  
آدرس پست الکترونیکی شما    
شماره تلفن
توضیحات  
تغییر کد امنیتی  
کد امنیت  
 
Powered by DorsaPortal